Duplicação do conjunto cromossômico em Coffea canephora Pierre ex A. Froehner e Coffea arabica L.
Nome: LUCIMARA RIBEIRO VENIAL
Tipo: Dissertação de mestrado acadêmico
Data de publicação: 26/02/2019
Banca:
Nome |
Papel |
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| ADÉSIO FERREIRA | Examinador Interno |
| ELIAS TERRA WERNER | Examinador Externo |
| PAULA MAURI BERNARDES | Examinador Externo |
| WELLINGTON RONILDO CLARINDO | Orientador |
Resumo: A poliploidia refere-se à ocorrência de mais de dois conjuntos cromossômicos por núcleo. A poliploidização sintética pode ser conduzida in vitro, em condições físicas e químicas controladas. As diferentes estratégias de poliploidização podem promover alterações genômicas e, consequentemente, os novos indivíduos podem exibir diferentes fenótipos acerca dos aspectos fisiológicos, morfológicos e reprodutivos quando comparados aos seus progenitores. Entretanto, alguns gargalos têm sido ressaltados por diferentes autores, tais como a alta taxa de mortalidade dos explantes, baixa taxa de regeneração de plântulas e grande número de mixoploides. Nesse contexto, as suspensões de agregados celulares (SAC), obtidas nas etapas iniciais da embriogênese somática indireta (ESI), representam um material vegetal promissor para duplicação do conjunto cromossômico (DCC) in vitro em virtude da elevada taxa de proliferação das células. Além disso, as SAC são matidas em agitação orbital constante, permitindo que mais células tenham contato direto com os compostos empregados para DCC diferente do que ocorre no sistema semissólido. Nesse trabalho, foi objetivado regenerar plântulas autotetraploides e autoalo-octaploides de Coffea canephora e Coffea arabica, respectivamente, a partir de um novo procedimento in vitro de DCC para Coffea. Explorando a ESI, as SACs foram tratadas com solução de colchicina 0,0 (controle), 0,5, 1,5 ou 2,5 mM em meio de cultura líquido sob agitação orbital constante por 48, 72 ou 96 h. Inoculadas em meio semissólido, as SAC passaram a ser denominadas de massa celular (MC), as quais mostraram respostas morfogênicas distintas entre as espécies de Coffea, tempo de tratamento e concetração de colchicina. Embriões somáticos cotiledonares maduros foram regenerados a partir de massas celulares tratadas com 2,5 mM/48 h e 2,5 mM/72 h para C. canephora e com 0,5 mM/48 h para C. arabica. Avaliando o nível de ploidia de DNA, 36 (34,9%) plântulas de C. canephora foram classificadas como autotetraploides (2n = 4x = 44) e 61 (21,1%) de C. arabica como autoalo-octaploides (2n = 8x = 88). O procedimento de DCC, explorando as SAC e a ESI, promoveu a duplicação de todo o genoma e resultou em um número relativamente alto de poliploides estáveis das duas espécies de Coffea. Portanto, considerando os resultados obtidos, a metodologia adotada para DCC in vitro é reprodutível para indução, regeneração e propagação in vitro de poliploides para Coffea, podendo ser adapatada para outras espécies arbustivas e lenhosas. Tendo em vista a novidade e a importância desse procedimento para gerar novos germoplasmas, foram mostradas a base e as etapas do procedimento DCC.
Palavras-chave: café, poliploidização, cultura de tecidos vegetais, citogenética.
